細胞培養

從體內組織取出細胞，在體外培養使其生長繁殖并維持其結構和功能的一種培養技術。

細胞培養的意義

1. 是細胞生物學研究中最基礎、最基本的一項技術，可以用來進行藥物篩選、疫苗生產、抗體制備等。

2. 可以模擬復雜的生命活動機制   in vitro(體外）-in vivo（體內）。最主要是大部分實驗無法把活體作為實驗對象，因此需要首先在細胞水平進行研究，再從體內進行驗證。

3. 可以通過細胞培養獲得大量實驗細胞，進而研究實驗細胞的信號轉導、物質及能量代謝以及細胞的增殖凋亡等。

常見細胞培養類型

1. 原代細胞培養：

從生物體組織、器官中分離得到的原代細胞，通過機械方法、酶、螯合劑（如EDTA）來處理分散成單細胞，置于培養基中進行培養，注意原代培養的貼壁依賴性細胞需要使用促進貼壁的包被培養皿（如使用多聚賴氨酸），從而幫助細胞貼壁，促進細胞的生長和增殖。。

2. 貼壁細胞培養：

貼壁培養主要適用于貼壁依賴性的細胞，細胞貼附于培養皿的表面生長，當生長鋪滿平面時會發生接觸抑制，此時就需要對細胞進行傳代處理。傳代方式也是采用酶消化法，可根據具體需要，選擇是否使用多聚賴氨酸鋪皿來促進細胞貼壁生長。

3. 懸浮細胞培養：

懸浮培養主要適用于非貼壁依賴性的細胞，細胞或者細胞的聚集體懸浮于培養液中，懸浮培養是一種大規模細胞培養的理想方式。懸浮培養需要保持良好的分散狀態，因此需要再振蕩的條件下培養，形成分散良好的懸浮培養物。當細胞培養至一定密度時需進行傳代，傳代時需去除較大的細胞聚集體和殘渣物。

4. 干細胞的培養：

干細胞具有自我更新和自我維持的能力，可以無限次地進行增殖分裂，是一類尚未充分分化多潛能的細胞，在一定條件下，可以分化成多種功能細胞。根據干細胞的類型選擇貼壁培養或懸浮培養的方式，通常干細胞生長于鋪有輔助附著的細胞外基質的成分（如明膠、基質膠或膠原蛋白等）或是MEF飼養層的培養皿上，除了這類傳統的二維培養技術，還可以使用三維的培養技術來模擬生物機體內環境，可根據不同的細胞類型來進行培養條件的優化和分析。

結果展示

大鼠神經元原代細胞                                       人臍靜脈內皮細胞

實驗完成周期及交付標準

1. 實驗周期：一般細胞培養時間為2-5天，特殊細胞培養根據細胞說明書而定。原代細胞需要購買動物提取組織進行分離和消化，一般時間為1-2周。

2. 交付標準：細胞圖片、實驗報告（試劑、耗材、實驗步驟）

需確認的信息

1. 需要培養細胞的具體名稱？

2. 客戶是否提供細胞還是我方代購？

3. 細胞培養只是為本實驗獲得標本，我們需要具體對細胞進行哪些具體生物學功能檢測？如增殖、凋亡、遷移、侵襲等。

文獻參考

[1] https://www.atcc.org/，細胞培養說明書ATCC網址。

[2] Autophagy modulates temozolomide-induced cell death in alveolar Rhabdomyosarcoma cells

[3] Erlotinib in Previously Treated Non–Small-Cell Lung Cancer 

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