時間：2021-09-26瀏覽次數：4776
Zenon?標記技術為制備熒光標記抗體提供了一種快速、通用且可靠的實驗方法，此標記方法可利用各種熒光染料，并且起始原料可以為極少量、未純化 (如雜交瘤細胞的培養上清液) 的抗體。 利用Zenon?標記技術標記的抗體適用于所有可使用直標抗體的應用領域。 Zenon? 標記技術的優勢包括:
● 10 分鐘貼記時間
● 每個標記1– 20 微克抗體
● 與BSA及其它穩定蛋白相容
● 無純化步驟
● 靈活的抗體標
Zenon?標記技術提供一種多功能的、易于使用的方法，用于標記人和小鼠的IgG1，IgG2a和IgG2b抗體及兔IgG抗體。 特殊設計的Zenon?片段只結合一抗的Fc片段，這種快速、非共價結合方法能夠迅速標記少量的一抗 (圖1) Zenon?標記技術簡單高效；整個標記步驟只需 10 分鐘。
Zenon?抗體偶聯物形成后可以穩定地儲存待用；在使用前需要添加非特異性IgG來封閉未結合的Zenon?片段，無需柱純化。 Zenon?復合物因而可直接應用到樣品中。
Zenon?標記技術標記的抗體與觀察到的直接標記的抗體偶聯物呈現相似的熒光強度或酶活性 (圖 2 )。
圖1. Zenon? 標記技術工作原理。 Zenon?抗體的非共價標記與微量標記試劑盒、單克隆標記試劑盒、蛋白標記試劑盒的共價標記比較。
 | 圖2. Zenon?標記技術生產出的標記抗體的亮度相當于或者比直接標記的抗體更亮。 使用別藻藍蛋白（APC）共軛標記或者使用1微克Zenon? APC復合物非共軛標記各種淋巴標志物抗體。 然后，標記的抗體用于人外周血淋巴細胞樣品的染色。 制備Zenon?染色復合物時，通過提高Zenon?標記技術試劑與所用一級抗體的比例可進一步提高該復合物的亮度。 |
當您需要改變標記物顏色或者檢測特定熒光是否適合您的應用或抗體時，Zenon?標記技術可提供獨特的標記靈活性。 可廣泛選擇的標記物、通用的標記技術，助您在流式細胞術 (圖 3 ) 和熒光成像 (圖 4 和 5 ) 中輕松獲得不同顏色組合成的多色應用圖像。
 | 圖3. 在流式細胞術中使用Zenon? 標記技術。 人外周血白細胞以下列三種抗體染色： 預先經Zenon? Alexa Fluor? 647 小鼠IgG1標記試劑盒 ( Z25008) 標記的抗CD3小鼠IgG1抗體 ( A21330 )、預先經Zenon? R-藻紅蛋白小鼠IgG1標記試劑盒 ( Z25055 ) 標記的抗CD4小鼠IgG1抗體 ( A21334) 和預先經Zenon? Alexa Fluor? 488 小鼠IgG2a標記試劑盒 ( Z25102 ) 標記的抗CD8小鼠IgG2a抗體 (A21338 )。 圖A和圖B顯示：分別區別橙色熒光信號與綠色熒光信號或者紅色熒光信號與橙色熒光信號，可以將細胞進行區分，證明Zenon?標記的抗體在同一樣品中不會互相干擾。 分析樣品所用儀器及設置為：Coulter Elite流式細胞儀，針對藻紅蛋白和Alexa Fluor? 488 染料使用 488 nm激發光，針對Alexa Fluor? 647 染料使用 633 nm激發光。 | |
 | 圖4. 在熒光成像中使用Zenon?標記技術。 切取厚度為 14 μm的小鼠海馬冠狀切片，應用Zenon? Alexa Fluor? 488 小鼠IgG1標記試劑盒 ( Z25002 ) 標記的抗α-微管蛋白抗體 ( A11126) 染色。 切片用NeuroTrace? 530/615 紅色熒光Nissl染料 ( N21482 ) 復染來觀察神經元胞體，用Hoechst 33258 ( H1398 , H3569, H21491 ) 染色來觀察細胞核。 | |
 | 圖5. 在熒光成像中使用Zenon?標記技術。 微管蛋白和線粒體探針標記的牛肺動脈內皮細胞 微管蛋白采用Zenon? Alexa Fluor? 488 小鼠IgG2b標記試劑盒 ( Z25202 ) 標記的抗α-微管蛋白小鼠IgG2b單克隆抗體檢測，線粒體采用Zenon? Alexa Fluor? 555 小鼠IgG2b標記試劑盒 ( Z25205 ) 標記抗氧化磷酸化酶復合體V亞單位α小鼠IgG2b單克隆抗體 ( A21350 ) 檢測。 使用DAPI( D1306 , D3571, D21490 )給核酸染色。 |
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