透射電鏡

Transmission Electron Microscope, 簡稱TEM，透射電鏡可以觀察樣品的內部精細結構，這些結構即亞顯微結構或者超微結構。透射電鏡使用的是透射電子，并收集透過樣品的電子，從而提供了樣品的內部結構的信息，如晶體結構、形態以及應力狀態的信息。目前最先進的TEM其空間分辨率達到了pm級別。由于透射電子的要求，TEM的樣品必須制備成超薄切片，通常為50-100 nm，樣品制備比較繁瑣，常用的方法有超薄切片法、冷凍超薄切片法、冷凍蝕刻法、冷凍斷裂法等。

實驗意義

1.透射電鏡是表征各種樣品的有力工具，它的多功能性和極高的空間分辨率使其在許多應用中非常有價值。

2.TEM能夠觀察樣品的內部結構，同時在病理診斷中可以補充和糾正光鏡診斷的疑難問題，可以提高病理診斷的準確性。

實驗步驟

透射電鏡生物樣品的制備：①取小于1立方毫米的組織；②用2.5%戊二醛（磷酸緩沖液配制）固定2小時，0.1M的磷酸緩沖液漂洗3次×15 min；③1%鋨酸固定液固定2小時，0.1M的磷酸緩沖液漂洗3次×15 min；④梯度乙醇進行脫水，4℃進行；⑤包埋：使用純丙酮+包埋液（2:1）室溫處理4小時，純丙酮+包埋液（1:2）室溫過夜，純包埋液37℃處理3小時；⑥固化：37度烘箱過夜，45度烘箱12小時，60度烘箱24小時；⑦超薄切片機切片，厚度在50 nm左右；⑧3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色；⑨透射電鏡觀察，拍片。

結果展示[1]

實驗完成周期及交付標準

1. 實驗周期：一個月左右

2. 交付標準：電鏡圖片、病理報告、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）

實驗需與客戶確認的信息

1. 樣本的種屬

2. 樣本類型，是組織還是細胞

3. 樣本數量

4. 透射電鏡分析要求、拍照要求或是參考文獻

參考文獻

[1] Xu T , Lu S , Zhang H . Transmission electron microscope evidence of telocytes in canine dura mater[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2016, 20(1):5.

[2] Cizmar P , Yuana Y . Detection and Characterization of Extracellular Vesicles by Transmission and Cryo-Transmission Electron Microscopy[J]. Methods in Molecular Biology, 2017, 1660:221.

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