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全基因合成

時間:2021-09-28瀏覽次數:4466



【晶萊生物】以前,實驗室通常用PCR和RT-PCR的方法來獲取某個基因片段,但是往往因為標本和模板等原因無法釣取該段基因。如今,我們采用化學合成的方法人工構建基因片段,即:全基因合成拼接技術。可以為廣大的科研朋友服務。
基因合成是指在體外合成雙鏈DNA分子的一門技術,與寡核苷酸合成有所不同,寡核苷酸是單鏈的,所能合成的最長片段僅為100nt左右,而基因合成則為雙鏈DNA分子合成,所能合成的長度范圍50bp-12 kb??筛鶕蛻粜枨?,我公司可以提供全基因合成服務,速度快、周期短、價格優惠。合成的基因可以根據客戶的需求連接到不同的載體上,最終提供的產品包括菌株以及凍干的質粒和全基因完整的測序報告。
 
全基因合成的適用范圍:
1、自然界中無法以常規實驗手段得到的基因。
2、研究人員通過自己的意愿設計基因序列,以得到自然界中不存在的基因。
3、對已知基因序列進行大量密碼子優化重排,以期達到對該基因進行高效表達或獲得新的生物特性等研究目的。
 
服務優勢:
1、合成基因最長已達到10.5KB,已完成基因超過10000條。
2、可以合成重復序列(重復次數無限制).高GC(小于80%).發夾(參照每200bp小于3個發夾為限).連續單一堿基重復(GC小于15個,AT小于20個)等富含特殊結構的基因注:特殊結構基因合成的相關數據是根據我公司曾經成功合成過的基因序列所做的總結,以作為您設計基因序列時判斷是否能順利合成作為參考,具體還需以實際基因序列來定。
3、基因可以克隆到客戶提供或指定的表達載體上。
4、免費提供基因結構設計.基因密碼子優化,基因克隆表達方案設計等基因合成相關咨詢服務。
 
全基因合成操作程序:
1、我們將對您需要合成的基因全序列進行分析,檢查基因內部是否含有重復序列,然后根據序列的具體情況設計合成方案。
2、在得到您認可后,我們將立即進行單鏈Oligo DNA 合成,DNA片段拼接等工作。然后把全長基因克隆到載體中,再通過DNA測序確認合成基因的正確性。
3、測序結果如果發現有錯誤位點,我們會采取相應的技術手段進行修復校對,保證整個序列的正確性。
 
注:因基因結構比較復雜,并非所有的片段都能順利合成。對于較長的片段或一些復雜結構如重復序列、高GC 片段等,可能會需要額外的時間調整合成方案。如果發生這種情況,技術人員會及時與您聯系,告知您合成進程。 所合成的基因一般克隆于通用載體中,如需克隆在客戶指定的載體中,我公司會酌情再收取一定的費用,并且交貨時間會適當延長。
 
 服務要求:

1、請您以EMAIL的形式提供需要合成的基因的序列。
2、請您說明實驗的具體要求:
      如:使用何種酶切位點,進行克隆,以及需要克隆到何種載體等。
3、本中心將免費提供PUC57-T載體,如果需要裝在其它載體中,請客戶自已提供。
4、簽訂基因合成技術保密協議,支付合成總價的50%作為預付款,本公司收到款項后開始合成基因注:基因合成開始日期為公司確認收到預付款后的第一個工作日
5、基因合成結束,通知客戶支付余下50%的合成款項

結果提供:
1、 基因合成報告單一份
2、含目的基因的質粒(不少于1ug)一份
3、含目的基因的菌株一份
4、基因合成的測序圖譜一份

晶萊生物服務流程


晶萊生物實驗服務項目

動物實驗細胞生物學病理實驗
消化系統模型細胞培養病理染色
胃酸分泌模型普通細胞株HE染色
膿毒癥模型細胞缺氧培養油紅O染色
胃潰瘍模型細胞培養+支架番紅固綠染色
胰腺炎模型干細胞培養Masson染色
肝纖維化模型原代細胞分離/提取/培養天狼猩紅染色
DIO肥胖模型細胞轉染/病毒感染PAS糖原染色
膽結石模型Trans well共培養阿利新藍染色
結腸炎(UC)模型細胞增殖甲苯胺藍染色
脂肪肝模型細胞計數尼氏染色
急性肝損傷模型生長曲線測定LFB髓鞘染色
免疫、代謝系統疾病模型存活曲線測定普魯士藍染色
骨質疏松模型ccK-8增殖檢測VG染色
糖尿病模型MTT增殖檢測EVG染色
高尿酸血癥模型CFSE檢測增殖-流式檢測VonKossa染色
呼吸系統模型BrDU檢測-免疫熒光法剛果紅染色
肺纖維化模型細胞凋亡蘇丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式檢測細胞凋亡Trap染色
急性肺損傷模型WB檢測凋亡相關蛋白抗酸染色
哮喘模型透射電鏡觀察凋亡小體革蘭氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB顯色)AB-PAS染色
支氣管炎模型Tunel(熒光法,含試劑盒)亞甲基藍染色
泌尿生殖系統模型DNA ladder法苯胺藍染色
慢性腎衰模型細胞周期熒光 DAPI染色
急性腎衰模型細胞顯微計數普魯士藍染色
腎間質纖維化模型PI染色間苯二酚堿性品紅染色
腎結石模型BrdU滲入法銀染
腎炎模型免疫熒光染色黑色素染色
子宮內膜異位癥模型PI流式檢測細胞周期鍍銀染色
心血管系統模型細胞運動PASM 六胺銀染色
冠心病模型Transwell檢測細胞遷移VG染色
心肌梗死模型Transwell檢測細胞侵襲富爾根染色
心臟驟停模型細胞劃痕亞甲基藍染色
慢性心力衰竭模型細胞克隆碘-碘化鉀染色
動脈粥樣硬化模型集落形成法/稀釋鋪板方法Goldner三色法染色
白血病模型軟瓊脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血壓模型毛細管克隆法改良苯酚品紅染色
神經系統模型體外實驗血管生成網狀纖維染色
腦卒中模型磁珠分選細胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性腦梗死模型流式分選細胞鍍銀染色
腦出血模型開機費movat五色染色
腦損傷模型單色維多利亞藍染色
脊髓損傷模型雙色免疫組化
帕金森模型CBA多細胞因子流式檢測免疫組化預式
老年癡呆模型組織/血液細胞制備免疫組化正式
應激模型組織單細胞制備免疫熒光(石蠟-單標)
骨骼疾病模型中性粒細胞提取免疫熒光(石蠟-雙標)
骨折模型其他樣本細胞制備(如血液等)免疫熒光(石蠟-三標)
骨缺損模型外周血PBMC分離免疫熒光(冰凍-單標)
風濕免疫性關節炎模型線粒體組學免疫熒光(冰凍-雙標)
骨關節炎模型線粒體膜電位檢測-流式法制片前處理
五官疾病模型線粒體膜電位檢測-免疫熒光法石蠟組織包埋
眼科疾病模型線粒體ROS生物含量檢測--流式特殊包埋(細胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型線粒體ROS生物含量檢測--免疫熒光軟化(肝硬化、皮膚結痂、植物等)
皮膚疾病模型線粒體通透性轉換孔(mPTP)骨組織脫鈣(?。?/span>
皮膚損傷模型溶酶體免疫熒光法骨組織脫鈣(大)
腫瘤疾病模型線粒體+溶酶體共定位骨組織EDTA脫鈣(?。?/span>
原位瘤模型內質網骨組織EDTA脫鈣(大)
轉移瘤模型線粒體鈣瞬時變化檢測-流式石蠟白片
皮下植瘤模型ATP檢測細胞爬片

ADP檢測

AMP檢測



流式DNA/RNA半定量檢測基因編輯工具
組織細胞懸液處理pcr檢測mRNA合成(3保1)片段/質粒/引物合成
細胞處理microRNA檢測質粒載體構建
血液標本處理LncRNA表達量的檢測過表達腺病毒載體構建包裝
細胞刺激培養CirRNA表達量的檢測shRNA腺病毒載體構建包裝
單色檢測凝膠電泳過表達慢病毒載體構建包裝
雙色檢測基因合成shRNA慢病毒載體構建包裝
Annexin V/PI凋亡<300過表達腺相關病毒載體構建包裝
細胞周期300-1,500shRNA腺病毒載體構建包裝

1500 - 5000穩轉細胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
組織勻漿處理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含試劑盒)48T/kitWB檢測一(10孔膜/指標)mRNA引物設計及合成
ELISA(不含試劑盒)96T/kit灰度值分析及作圖一(10孔膜/指標)miRNA引物設計及合成
ELISA(含國產試劑盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物設計及合成
ELISA(含國產試劑盒)96T/kitWB檢測二(10孔膜/指標)CircRNA引物設計及合成

灰度值分析及作圖二(10孔膜/指標)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


CircRNA RT-qPCR



收費標準/服務周期/提供結果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電咨詢!

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【平臺項目開展范圍】慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設計指導、基金申請指導等服務。


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