
時間:2021-09-28瀏覽次數:4466

【晶萊生物】以前,實驗室通常用PCR和RT-PCR的方法來獲取某個基因片段,但是往往因為標本和模板等原因無法釣取該段基因。如今,我們采用化學合成的方法人工構建基因片段,即:全基因合成拼接技術。可以為廣大的科研朋友服務。
基因合成是指在體外合成雙鏈DNA分子的一門技術,與寡核苷酸合成有所不同,寡核苷酸是單鏈的,所能合成的最長片段僅為100nt左右,而基因合成則為雙鏈DNA分子合成,所能合成的長度范圍50bp-12 kb??筛鶕蛻粜枨?,我公司可以提供全基因合成服務,速度快、周期短、價格優惠。合成的基因可以根據客戶的需求連接到不同的載體上,最終提供的產品包括菌株以及凍干的質粒和全基因完整的測序報告。
全基因合成的適用范圍:
1、自然界中無法以常規實驗手段得到的基因。
2、研究人員通過自己的意愿設計基因序列,以得到自然界中不存在的基因。
3、對已知基因序列進行大量密碼子優化重排,以期達到對該基因進行高效表達或獲得新的生物特性等研究目的。
服務優勢:
1、合成基因最長已達到10.5KB,已完成基因超過10000條。
2、可以合成重復序列(重復次數無限制).高GC(小于80%).發夾(參照每200bp小于3個發夾為限).連續單一堿基重復(GC小于15個,AT小于20個)等富含特殊結構的基因注:特殊結構基因合成的相關數據是根據我公司曾經成功合成過的基因序列所做的總結,以作為您設計基因序列時判斷是否能順利合成作為參考,具體還需以實際基因序列來定。
3、基因可以克隆到客戶提供或指定的表達載體上。
4、免費提供基因結構設計.基因密碼子優化,基因克隆表達方案設計等基因合成相關咨詢服務。
全基因合成操作程序:
1、我們將對您需要合成的基因全序列進行分析,檢查基因內部是否含有重復序列,然后根據序列的具體情況設計合成方案。
2、在得到您認可后,我們將立即進行單鏈Oligo DNA 合成,DNA片段拼接等工作。然后把全長基因克隆到載體中,再通過DNA測序確認合成基因的正確性。
3、測序結果如果發現有錯誤位點,我們會采取相應的技術手段進行修復校對,保證整個序列的正確性。
注:因基因結構比較復雜,并非所有的片段都能順利合成。對于較長的片段或一些復雜結構如重復序列、高GC 片段等,可能會需要額外的時間調整合成方案。如果發生這種情況,技術人員會及時與您聯系,告知您合成進程。 所合成的基因一般克隆于通用載體中,如需克隆在客戶指定的載體中,我公司會酌情再收取一定的費用,并且交貨時間會適當延長。
服務要求:
1、請您以EMAIL的形式提供需要合成的基因的序列。
2、請您說明實驗的具體要求:
如:使用何種酶切位點,進行克隆,以及需要克隆到何種載體等。
3、本中心將免費提供PUC57-T載體,如果需要裝在其它載體中,請客戶自已提供。
4、簽訂基因合成技術保密協議,支付合成總價的50%作為預付款,本公司收到款項后開始合成基因注:基因合成開始日期為公司確認收到預付款后的第一個工作日
5、基因合成結束,通知客戶支付余下50%的合成款項
結果提供:
1、 基因合成報告單一份
2、含目的基因的質粒(不少于1ug)一份
3、含目的基因的菌株一份
4、基因合成的測序圖譜一份
晶萊生物服務流程
晶萊生物實驗服務項目
| 動物實驗 | 細胞生物學 | 病理實驗 |
| 消化系統模型 | 細胞培養 | 病理染色 |
| 胃酸分泌模型 | 普通細胞株 | HE染色 |
| 膿毒癥模型 | 細胞缺氧培養 | 油紅O染色 |
| 胃潰瘍模型 | 細胞培養+支架 | 番紅固綠染色 |
| 胰腺炎模型 | 干細胞培養 | Masson染色 |
| 肝纖維化模型 | 原代細胞分離/提取/培養 | 天狼猩紅染色 |
| DIO肥胖模型 | 細胞轉染/病毒感染 | PAS糖原染色 |
| 膽結石模型 | Trans well共培養 | 阿利新藍染色 |
| 結腸炎(UC)模型 | 細胞增殖 | 甲苯胺藍染色 |
| 脂肪肝模型 | 細胞計數 | 尼氏染色 |
| 急性肝損傷模型 | 生長曲線測定 | LFB髓鞘染色 |
| 免疫、代謝系統疾病模型 | 存活曲線測定 | 普魯士藍染色 |
| 骨質疏松模型 | ccK-8增殖檢測 | VG染色 |
| 糖尿病模型 | MTT增殖檢測 | EVG染色 |
| 高尿酸血癥模型 | CFSE檢測增殖-流式檢測 | VonKossa染色 |
| 呼吸系統模型 | BrDU檢測-免疫熒光法 | 剛果紅染色 |
| 肺纖維化模型 | 細胞凋亡 | 蘇丹黑B染色 |
| 慢性肺阻塞模型 | Annexin V/PI流式檢測細胞凋亡 | Trap染色 |
| 急性肺損傷模型 | WB檢測凋亡相關蛋白 | 抗酸染色 |
| 哮喘模型 | 透射電鏡觀察凋亡小體 | 革蘭氏染色 |
| 肺栓塞模型 | Tunel染色(POD法,DAB顯色) | AB-PAS染色 |
| 支氣管炎模型 | Tunel(熒光法,含試劑盒) | 亞甲基藍染色 |
| 泌尿生殖系統模型 | DNA ladder法 | 苯胺藍染色 |
| 慢性腎衰模型 | 細胞周期 | 熒光 DAPI染色 |
| 急性腎衰模型 | 細胞顯微計數 | 普魯士藍染色 |
| 腎間質纖維化模型 | PI染色 | 間苯二酚堿性品紅染色 |
| 腎結石模型 | BrdU滲入法 | 銀染 |
| 腎炎模型 | 免疫熒光染色 | 黑色素染色 |
| 子宮內膜異位癥模型 | PI流式檢測細胞周期 | 鍍銀染色 |
| 心血管系統模型 | 細胞運動 | PASM 六胺銀染色 |
| 冠心病模型 | Transwell檢測細胞遷移 | VG染色 |
| 心肌梗死模型 | Transwell檢測細胞侵襲 | 富爾根染色 |
| 心臟驟停模型 | 細胞劃痕 | 亞甲基藍染色 |
| 慢性心力衰竭模型 | 細胞克隆 | 碘-碘化鉀染色 |
| 動脈粥樣硬化模型 | 集落形成法/稀釋鋪板方法 | Goldner三色法染色 |
| 白血病模型 | 軟瓊脂克隆法 | PAS-萘酚磺S染色 |
| 高血壓模型 | 毛細管克隆法 | 改良苯酚品紅染色 |
| 神經系統模型 | 體外實驗血管生成 | 網狀纖維染色 |
| 腦卒中模型 | 磁珠分選細胞 | β-半乳糖苷酶染色 |
| 栓塞性腦梗死模型 | 流式分選細胞 | 鍍銀染色 |
| 腦出血模型 | 開機費 | movat五色染色 |
| 腦損傷模型 | 單色 | 維多利亞藍染色 |
| 脊髓損傷模型 | 雙色 | 免疫組化 |
| 帕金森模型 | CBA多細胞因子流式檢測 | 免疫組化預式 |
| 老年癡呆模型 | 組織/血液細胞制備 | 免疫組化正式 |
| 應激模型 | 組織單細胞制備 | 免疫熒光(石蠟-單標) |
| 骨骼疾病模型 | 中性粒細胞提取 | 免疫熒光(石蠟-雙標) |
| 骨折模型 | 其他樣本細胞制備(如血液等) | 免疫熒光(石蠟-三標) |
| 骨缺損模型 | 外周血PBMC分離 | 免疫熒光(冰凍-單標) |
| 風濕免疫性關節炎模型 | 線粒體組學 | 免疫熒光(冰凍-雙標) |
| 骨關節炎模型 | 線粒體膜電位檢測-流式法 | 制片前處理 |
| 五官疾病模型 | 線粒體膜電位檢測-免疫熒光法 | 石蠟組織包埋 |
| 眼科疾病模型 | 線粒體ROS生物含量檢測--流式 | 特殊包埋(細胞、材料、眼球等) |
| 鼻腔疾病模型 | 線粒體ROS生物含量檢測--免疫熒光 | 軟化(肝硬化、皮膚結痂、植物等) |
| 皮膚疾病模型 | 線粒體通透性轉換孔(mPTP) | 骨組織脫鈣(?。?/span> |
| 皮膚損傷模型 | 溶酶體免疫熒光法 | 骨組織脫鈣(大) |
| 腫瘤疾病模型 | 線粒體+溶酶體共定位 | 骨組織EDTA脫鈣(?。?/span> |
| 原位瘤模型 | 內質網 | 骨組織EDTA脫鈣(大) |
| 轉移瘤模型 | 線粒體鈣瞬時變化檢測-流式 | 石蠟白片 |
| 皮下植瘤模型 | ATP檢測 | 細胞爬片 |
| ADP檢測 | ||
| AMP檢測 | ||
| 流式 | DNA/RNA半定量檢測 | 基因編輯工具 |
| 組織細胞懸液處理 | pcr檢測mRNA | 合成(3保1)片段/質粒/引物合成 |
| 細胞處理 | microRNA檢測 | 質粒載體構建 |
| 血液標本處理 | LncRNA表達量的檢測 | 過表達腺病毒載體構建包裝 |
| 細胞刺激培養 | CirRNA表達量的檢測 | shRNA腺病毒載體構建包裝 |
| 單色檢測 | 凝膠電泳 | 過表達慢病毒載體構建包裝 |
| 雙色檢測 | 基因合成 | shRNA慢病毒載體構建包裝 |
| Annexin V/PI凋亡 | <300 | 過表達腺相關病毒載體構建包裝 |
| 細胞周期 | 300-1,500 | shRNA腺病毒載體構建包裝 |
| 1500 - 5000 | 穩轉細胞株 | |
| >5000 | ||
| 特殊序列 | ||
| ELISA | WB | qPCR |
| 組織勻漿處理 | 蛋白提取及定量一 | RNA抽提 |
| ELISA(不含試劑盒)48T/kit | WB檢測一(10孔膜/指標) | mRNA引物設計及合成 |
| ELISA(不含試劑盒)96T/kit | 灰度值分析及作圖一(10孔膜/指標) | miRNA引物設計及合成 |
| ELISA(含國產試劑盒)48T/kit | 蛋白提取及定量二 | LncRNA引物設計及合成 |
| ELISA(含國產試劑盒)96T/kit | WB檢測二(10孔膜/指標) | CircRNA引物設計及合成 |
| 灰度值分析及作圖二(10孔膜/指標) | mRNA RT-qPCR | |
| miRNA RT-qPCR | ||
| LncRNA RT-qPCR | ||
| CircRNA RT-qPCR |
收費標準/服務周期/提供結果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
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【平臺項目開展范圍】慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設計指導、基金申請指導等服務。
