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腦缺血在臨床上具有較高的發(fā)病率和死亡率,嚴(yán)重危害中老年患者健康,尋找有明確療效且作用機(jī)制清晰的預(yù)防和治療腦梗死的藥物是當(dāng)前研究的前沿課題和熱點(diǎn)領(lǐng)域。因此,腦缺血?jiǎng)游锬P偷闹苽湓诳茖W(xué)研究中具有重要意義。
MCAO 模型制備:
術(shù)前準(zhǔn)備見(jiàn)左圖,選擇 220-250g 的 SD 大鼠,10% 水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰臥位,頸部正中剃毛消毒備用(右圖)

剪開頸部皮膚,鈍性分離頸部肌肉,暴露并游離單側(cè)頸動(dòng)脈,穿線備用。

動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉主動(dòng)脈,并結(jié)扎頸外動(dòng)脈。主動(dòng)脈用注射器針頭挑開小口,插入自制線栓到頸內(nèi)動(dòng)脈,大約 2.5-3cm。結(jié)扎頸內(nèi)動(dòng)脈,結(jié)扎主動(dòng)脈近心端,松開動(dòng)脈夾。

逐層縫合,根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要的缺血時(shí)間進(jìn)行拔栓手術(shù)(再灌注),拔栓時(shí)動(dòng)物要完全麻醉,把出線栓的長(zhǎng)度約為 0.5cm。
模型成功的評(píng)判方法
神經(jīng)功能缺損(NDS)評(píng)分
0 分:活動(dòng)基本正常,無(wú)明顯神經(jīng)病學(xué)癥狀;
1 分:左側(cè)前爪無(wú)法完全伸展;
2 分:爬行時(shí)向左側(cè)轉(zhuǎn)圈;
3 分:行走時(shí)向偏癱側(cè)傾倒;
4 分:不能自動(dòng)行走,有意識(shí)障礙
5 分:死亡
水迷宮實(shí)驗(yàn)
Morris 水迷宮(Morris water maze, MWM)實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。(左圖正常,右圖模型)

TTC 染色
TTC 染色是常用來(lái)評(píng)價(jià)腦缺血損傷的指標(biāo),缺血區(qū)域會(huì)呈白色。

HE 染色
一般發(fā)生缺血損傷的腦組織的神經(jīng)元細(xì)胞會(huì)受到明顯損傷(上側(cè)正常,下側(cè)損傷)


TUNEL 染色
發(fā)生損傷的腦組織,TUNEL 染色的細(xì)胞會(huì)明顯增多。

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