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| 脊髓損傷 | 開放型急性脊髓損傷模型 | 大鼠 |
| 閉合型急性脊髓損傷模型 | 大/小鼠 | |
| 慢性缺血性脊髓損傷 | 大鼠/兔 |
急性脊髓損傷(ASCI)小鼠模型的建模方法
模式動物品系：SPF級ICR小鼠，健康，雄性，8~12W
實驗分組：實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。
實驗周期：4-6 weeks
建模方法：
取 ICR 小鼠，戊Ba比妥鈉麻醉后，采用椎板切除術(shù)暴露 T9-T10 處脊髓。然后采用脊髓打擊器，于暴露脊髓處施加 90 kilodynes 的力造成挫傷型脊髓損傷，SCI 后連續(xù) 10 天每天肌肉注射慶大霉素（8mg/kg）防止術(shù)后感染，并每天兩次人工膀胱按壓擠尿直至恢復(fù)自主膀胱活動為止（防止尿潴留）。
處理一周后進行 BBB 評分評估小鼠后肢運動能力；
BBB score=0 時，則模型構(gòu)建成功。將構(gòu)模成功的小鼠分為兩組，每組 8只，于挫傷型 SCI 處理 1week 后，于大鼠尾靜脈處進行注射處理（模型組只注射生理鹽水，治療組注射含有受試藥物的生理鹽水 ）。
SCI 后，16 只小鼠飼養(yǎng) 3week 時，根據(jù)SCI后 3 week 結(jié)果每組取 3 只效果最顯著的小鼠取脊髓進行病理學檢測，剩余 10 只小鼠繼續(xù)飼養(yǎng)并與5week，7week，9week進行BBB 評分和機械觸誘發(fā)痛檢測。SCI后 9week 時所有受損脊髓中心進行凍存或 OCT 包埋。
模型評價
1. BBB test
于藥物注射后每隔一周進行 BBB test，直至移植后 8 周（即 SCI 后 3week、5week、7week、9week）。藥物注射后 2 周（即 SCI 后 3week）共 16 只小鼠進行行為學檢測數(shù)據(jù)，選擇變化顯著的 3 只小鼠（每組 3 只，即 6 只小鼠）的脊髓組織進行病理學檢測。剩余 5 只小鼠（每組 5 只，即 10 只小鼠）依舊隔一周（即 SCI 后 5week、7week、9week）進行 BBB test。分值范圍為0-21分，其中0分代表后肢完全失去運動功能，21分代表后肢運動功能基本正常。
2. Mechanical allodynia test （機械觸誘發(fā)痛檢測）
使用 Von Frey 測痛套件，記錄縮足的壓力（g），2 分鐘時間間隔內(nèi)測量 4 次，剔除最大值和最小值后獲取的中間值作為痛閾（g）。
脊髓損傷模型的建立及術(shù)后小鼠情況：
所有實驗小鼠在打擊時均出現(xiàn)痙攣性擺尾，雙下肢及軀體回縮撲動，隨后雙下肢癱瘓，損傷節(jié)段脊髓硬膜完整、出血、水腫。所有麻醉后小鼠于術(shù)后蘇醒，出現(xiàn)雙下肢癱瘓，運動、感覺功能喪失，依靠雙上肢移動軀體，頭頸部活動正常。術(shù)后1d，所有小鼠BBB評分均小于1分，活動明顯減少，進食、飲水量減少，協(xié)助排尿7d后大部分小鼠恢復(fù)自主排尿功能。
機械觸誘發(fā)痛檢測：將小鼠置于金屬網(wǎng)格的架子上使之適應(yīng)環(huán)境，采用Von Frey絲自足底下方垂直剌激后爪底皮膚表面，能引起陽性縮爪反應(yīng)所需的最低力度記為縮爪閾值，造模后小鼠的PWTs值較正常小鼠均下降。
組織病理學
3.免疫熒光
藥物注射后兩周，取受損脊髓組織，石蠟切片后，檢測其中 MAP-1 的表達分布。
4.小膠質(zhì)細胞/ 巨噬細胞檢測— 激光共聚焦
藥物注射后兩周，取受損脊髓組織，石蠟切片后，檢測其中 ED1（小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞活化 marker）。
需確認的信息
1. 模型種屬（大鼠還是小鼠或是其他種屬）
2. 動物體重有無要求，年齡有無要求
3. 雌雄有無要求
4. 模型構(gòu)建具體方案
5. 取材要求（采血、取組織樣本）
晶萊生物服務(wù)流程
晶萊生物實驗服務(wù)項目
| 動物實驗 | 細胞生物學 | 病理實驗 |
| 消化系統(tǒng)模型 | 細胞培養(yǎng) | 病理染色 |
| 胃酸分泌模型 | 普通細胞株 | HE染色 |
| 膿毒癥模型 | 細胞缺氧培養(yǎng) | 油紅O染色 |
| 胃潰瘍模型 | 細胞培養(yǎng)+支架 | 番紅固綠染色 |
| 胰腺炎模型 | 干細胞培養(yǎng) | Masson染色 |
| 肝纖維化模型 | 原代細胞分離/提取/培養(yǎng) | 天狼猩紅染色 |
| DIO肥胖模型 | 細胞轉(zhuǎn)染/病毒感染 | PAS糖原染色 |
| 膽結(jié)石模型 | Trans well共培養(yǎng) | 阿利新藍染色 |
| 結(jié)腸炎(UC)模型 | 細胞增殖 | 甲苯胺藍染色 |
| 脂肪肝模型 | 細胞計數(shù) | 尼氏染色 |
| 急性肝損傷模型 | 生長曲線測定 | LFB髓鞘染色 |
| 免疫、代謝系統(tǒng)疾病模型 | 存活曲線測定 | 普魯士藍染色 |
| 骨質(zhì)疏松模型 | ccK-8增殖檢測 | VG染色 |
| 糖尿病模型 | MTT增殖檢測 | EVG染色 |
| 高尿酸血癥模型 | CFSE檢測增殖-流式檢測 | VonKossa染色 |
| 呼吸系統(tǒng)模型 | BrDU檢測-免疫熒光法 | 剛果紅染色 |
| 肺纖維化模型 | 細胞凋亡 | 蘇丹黑B染色 |
| 慢性肺阻塞模型 | Annexin V/PI流式檢測細胞凋亡 | Trap染色 |
| 急性肺損傷模型 | WB檢測凋亡相關(guān)蛋白 | 抗酸染色 |
| 哮喘模型 | 透射電鏡觀察凋亡小體 | 革蘭氏染色 |
| 肺栓塞模型 | Tunel染色(POD法,DAB顯色) | AB-PAS染色 |
| 支氣管炎模型 | Tunel(熒光法,含試劑盒) | 亞甲基藍染色 |
| 泌尿生殖系統(tǒng)模型 | DNA ladder法 | 苯胺藍染色 |
| 慢性腎衰模型 | 細胞周期 | 熒光 DAPI染色 |
| 急性腎衰模型 | 細胞顯微計數(shù) | 普魯士藍染色 |
| 腎間質(zhì)纖維化模型 | PI染色 | 間苯二酚堿性品紅染色 |
| 腎結(jié)石模型 | BrdU滲入法 | 銀染 |
| 腎炎模型 | 免疫熒光染色 | 黑色素染色 |
| 子宮內(nèi)膜異位癥模型 | PI流式檢測細胞周期 | 鍍銀染色 |
| 心血管系統(tǒng)模型 | 細胞運動 | PASM 六胺銀染色 |
| 冠心病模型 | Transwell檢測細胞遷移 | VG染色 |
| 心肌梗死模型 | Transwell檢測細胞侵襲 | 富爾根染色 |
| 心臟驟停模型 | 細胞劃痕 | 亞甲基藍染色 |
| 慢性心力衰竭模型 | 細胞克隆 | 碘-碘化鉀染色 |
| 動脈粥樣硬化模型 | 集落形成法/稀釋鋪板方法 | Goldner三色法染色 |
| 白血病模型 | 軟瓊脂克隆法 | PAS-萘酚磺S染色 |
| 高血壓模型 | 毛細管克隆法 | 改良苯酚品紅染色 |
| 神經(jīng)系統(tǒng)模型 | 體外實驗血管生成 | 網(wǎng)狀纖維染色 |
| 腦卒中模型 | 磁珠分選細胞 | β-半乳糖苷酶染色 |
| 栓塞性腦梗死模型 | 流式分選細胞 | 鍍銀染色 |
| 腦出血模型 | 開機費 | movat五色染色 |
| 腦損傷模型 | 單色 | 維多利亞藍染色 |
| 脊髓損傷模型 | 雙色 | 免疫組化 |
| 帕金森模型 | CBA多細胞因子流式檢測 | 免疫組化預(yù)式 |
| 老年癡呆模型 | 組織/血液細胞制備 | 免疫組化正式 |
| 應(yīng)激模型 | 組織單細胞制備 | 免疫熒光（石蠟-單標） |
| 骨骼疾病模型 | 中性粒細胞提取 | 免疫熒光（石蠟-雙標） |
| 骨折模型 | 其他樣本細胞制備（如血液等） | 免疫熒光（石蠟-三標） |
| 骨缺損模型 | 外周血PBMC分離 | 免疫熒光（冰凍-單標） |
| 風濕免疫性關(guān)節(jié)炎模型 | 線粒體組學 | 免疫熒光（冰凍-雙標） |
| 骨關(guān)節(jié)炎模型 | 線粒體膜電位檢測-流式法 | 制片前處理 |
| 五官疾病模型 | 線粒體膜電位檢測-免疫熒光法 | 石蠟組織包埋 |
| 眼科疾病模型 | 線粒體ROS生物含量檢測--流式 | 特殊包埋（細胞、材料、眼球等） |
| 鼻腔疾病模型 | 線粒體ROS生物含量檢測--免疫熒光 | 軟化（肝硬化、皮膚結(jié)痂、植物等） |
| 皮膚疾病模型 | 線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP） | 骨組織脫鈣（小） |
| 皮膚損傷模型 | 溶酶體免疫熒光法 | 骨組織脫鈣（大） |
| 腫瘤疾病模型 | 線粒體+溶酶體共定位 | 骨組織EDTA脫鈣（小） |
| 原位瘤模型 | 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) | 骨組織EDTA脫鈣（大） |
| 轉(zhuǎn)移瘤模型 | 線粒體鈣瞬時變化檢測-流式 | 石蠟白片 |
| 皮下植瘤模型 | ATP檢測 | 細胞爬片 |
| ADP檢測 | ||
| AMP檢測 | ||
| 流式 | DNA/RNA半定量檢測 | 基因編輯工具 |
| 組織細胞懸液處理 | pcr檢測mRNA | 合成（3保1）片段/質(zhì)粒/引物合成 |
| 細胞處理 | microRNA檢測 | 質(zhì)粒載體構(gòu)建 |
| 血液標本處理 | LncRNA表達量的檢測 | 過表達腺病毒載體構(gòu)建包裝 |
| 細胞刺激培養(yǎng) | CirRNA表達量的檢測 | shRNA腺病毒載體構(gòu)建包裝 |
| 單色檢測 | 凝膠電泳 | 過表達慢病毒載體構(gòu)建包裝 |
| 雙色檢測 | 基因合成 | shRNA慢病毒載體構(gòu)建包裝 |
| Annexin V/PI凋亡 | ＜300 | 過表達腺相關(guān)病毒載體構(gòu)建包裝 |
| 細胞周期 | 300-1,500 | shRNA腺病毒載體構(gòu)建包裝 |
| 1500 - 5000 | 穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株 | |
| >5000 | ||
| 特殊序列 | ||
| ELISA | WB | qPCR |
| 組織勻漿處理 | 蛋白提取及定量一 | RNA抽提 |
| ELISA（不含試劑盒）48T/kit | WB檢測一（10孔膜/指標） | mRNA引物設(shè)計及合成 |
| ELISA（不含試劑盒）96T/kit | 灰度值分析及作圖一（10孔膜/指標） | miRNA引物設(shè)計及合成 |
| ELISA（含國產(chǎn)試劑盒）48T/kit | 蛋白提取及定量二 | LncRNA引物設(shè)計及合成 |
| ELISA（含國產(chǎn)試劑盒）96T/kit | WB檢測二（10孔膜/指標） | CircRNA引物設(shè)計及合成 |
| 灰度值分析及作圖二（10孔膜/指標） | mRNA RT-qPCR | |
| miRNA RT-qPCR | ||
| LncRNA RT-qPCR | ||
| CircRNA RT-qPCR |
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
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