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鮑曼不動(dòng)桿菌( Acinetobacter baumannii ) 是需氧的不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌, 屬條件致病菌, 主要引起 醫(yī) 院 獲 得 性 肺 炎, 尤 其 是 呼 吸 機(jī) 相 關(guān) 性 肺 炎( VAP ), 亦可引 起血流感染、 腦膜炎、 腹膜炎、 傷口感染等多種感染 。
小 鼠 氣 管 插 管 操 作 步 驟 :
建立在耳窺鏡直視下 小鼠氣管插管方法。 具體步驟如下: 采用 1. 25% 2 , 2 , 2 三溴乙醇( 25 mg /kg)腹腔注射, 待小鼠麻醉后仰臥位固定小鼠于嚙齒動(dòng)物工作臺(tái) 上, 采用門(mén) 齒環(huán)一端鉤住小鼠門(mén)齒, 另 一端固定于操作臺(tái), 緩慢傾斜工作臺(tái)至 45° , 操作者右手持直頭鑷牽拉小鼠舌頭, 左手持帶電池手柄的耳窺鏡, 耳窺鏡尖端深入小鼠舌上, 透
過(guò)耳窺鏡的放大鏡, 操作者可觀察到小鼠的聲門(mén) 隨呼吸而開(kāi)啟 、閉合。 在小鼠聲門(mén)開(kāi)啟 的瞬間, 操作者迅速將已安裝氣管插管的氣管內(nèi) 導(dǎo)管插入氣道, 并退出導(dǎo)管。 將喉鏡緊貼氣管插管口 , 若喉鏡表面有霧氣形成表明插管成功。
注射菌液 :
氣管插管成功后, 沿氣管插管注射 10 μ L 鮑曼不動(dòng)桿菌菌液, 吹打 3 次, 確保菌液全部進(jìn)入小鼠肺部。 小鼠在嚙齒動(dòng)物操作臺(tái) 豎立 1min 后, 緩 慢 放 平 操 作 臺(tái), 將 小 鼠 放 回 飼 養(yǎng) 籠 中。
肺組織細(xì)菌定量:
待麻醉小鼠全部蘇醒,頸椎脫臼 法處死小鼠, 無(wú)菌操作取出 小鼠兩肺, 稱(chēng)重后每 0. 1 g 肺加入 0. 9 mL 生理鹽水, 組織勻漿機(jī)研磨, 取 100μ L經(jīng)系列稀釋后接種于 LB 培養(yǎng)基培養(yǎng)16 h 后行菌落計(jì)數(shù), 繼而計(jì)算出 每克肺組織的細(xì)菌含量。
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